枯草芽孢桿菌的啟動子篩選
2016/8/16 10:04:01點擊：
枯草芽孢桿菌因其獨特的代謝途徑、常被用于合成生物學和代謝工程，因此，需要對其內在生物部件進行評估，目的是確定最佳策略來調節(jié)代謝通路和表達目標蛋白。通過報告基因表達量（如綠色熒光蛋白的熒光單位）評估啟動子強弱是一種常用方法。中國科學院天津工業(yè)生物技術研究所張大偉課題組對枯草芽孢桿菌的啟動子作了篩選與鑒定，相關結果發(fā)表在《PLOS ONE》雜志上。
在這項研究中，研究人員測試了84個、分布在不同蛋白上游的預測啟動子，不同蛋白包括熱激蛋白和細胞壁蛋白等。測試發(fā)現(xiàn)84個啟動子的活性是最強啟動子P43的0.0023-4.53倍不等。這些啟動子在高溫或是有乙醇的培養(yǎng)基中的活性變化不大，但有些在高滲透壓下活性有所提高。從中隨機挑選了啟動子用于啟動耐熱β-半乳糖苷酶的表達，結果發(fā)現(xiàn)轉錄水平相當，說明這些啟動子可在不同遺傳背景下發(fā)揮作用。此外，從中挑選的啟動子可使胞質β-半乳糖苷酶和α-淀粉酶（分泌蛋白）的轉錄分別提高4倍和2倍。這項研究所得到的數(shù)據(jù)使得我們對枯草芽孢桿菌的代謝有了更深的了解，便于我們今后對它的改造利用。
在這項研究中，研究人員測試了84個、分布在不同蛋白上游的預測啟動子，不同蛋白包括熱激蛋白和細胞壁蛋白等。測試發(fā)現(xiàn)84個啟動子的活性是最強啟動子P43的0.0023-4.53倍不等。這些啟動子在高溫或是有乙醇的培養(yǎng)基中的活性變化不大，但有些在高滲透壓下活性有所提高。從中隨機挑選了啟動子用于啟動耐熱β-半乳糖苷酶的表達，結果發(fā)現(xiàn)轉錄水平相當，說明這些啟動子可在不同遺傳背景下發(fā)揮作用。此外，從中挑選的啟動子可使胞質β-半乳糖苷酶和α-淀粉酶（分泌蛋白）的轉錄分別提高4倍和2倍。這項研究所得到的數(shù)據(jù)使得我們對枯草芽孢桿菌的代謝有了更深的了解，便于我們今后對它的改造利用。
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